


实验名称:双歧杆菌的超声波细胞破碎实验
实验目的:使用超声波细胞破碎仪破碎双歧杆菌细胞,以获得细胞内的蛋白质或其他生物大分子。
实验材料与仪器
双歧杆菌培养物
超声波细胞破碎仪(深那SN-P1200)
冰浴
1.5 mL离心管
移液器及相应吸头
离心机
PBS缓冲液
实验步骤
一、准备工作:
将双歧杆菌培养物放入离心管中,以8000 rpm离心10分钟,收集菌体。
弃上清,用PBS缓冲液重悬菌体,重复洗涤两次。
二、超声波破碎:
将重悬后的菌体液置于冰浴中。
将样品分装到1.5 mL离心管,每管1 mL。
将超声波细胞破碎仪的探头插入样品中,确保探头浸没在液面以下。
设置超声波破碎仪参数:
频率:20 kHz
功率:400 W
超声时间:每次5秒
间隔时间:5秒
总时间:8分钟
在超声过程中,确保样品始终保持在冰浴中,以防止样品过热。
三、样品处理
超声破碎后,将样品再次以8000 rpm离心10分钟,收集上清液(破碎后的细胞裂解液)。
上清液即为破碎后的细胞内容物,可用于后续的蛋白质分析或其他实验。
结论
通过超声波细胞破碎仪成功破碎了双歧杆菌细胞,得到了细胞内的蛋白质,实验结果符合预期。